Kontrolowana próba szczepionki typu 16 wirusa brodawczaka ludzkiego cd

Kobiety z pojedynczym testem Papanicolaou, wykazującym atypowe komórki płaskokomórkowe lub gruczołowe o nieznanym znaczeniu lub śródnabłonkowe zmiany śródnabłonkowe niskiej jakości, były kierowane zgodnie z miejscowym standardem opieki. U kobiet z nieprawidłowościami kolposkopowymi wykonano biopsję. Dla każdego nieprawidłowego obszaru uzyskano dwie sąsiednie próbki biopsyjne. Pierwszy okaz został wysłany do diagnozy patologicznej. Drugą próbkę umieszczono w pożywce do transportu próbek (Digene) i przedłożono do typowania HPV z użyciem reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR).
Analizy cytologiczne i histologiczne
Próbki szyjki macicy do badania Papanicolaou zdeponowano w PreservCyt (Cytyc). Cienkowarstwowe preparaty przygotowano zgodnie ze specyfikacjami producenta, badano przesiewowo przez cytotechnologów i sprawdzano przez patologów w wyznaczonych laboratoriach cytologicznych. Wyniki zostały sklasyfikowane jako niezadowalające, jeśli ponad 60 procent docelowego obszaru szkiełka nie miało komórek nabłonka. Zmiany komórkowe zostały sklasyfikowane zgodnie z systemem Bethesda.24
Próbki z biopsji zostały utrwalone w 10% formalinie i osadzone w parafinie. Preparaty barwiono hematoksyliną i eozyną i najpierw sprawdzano patologa centralnego laboratorium dla celów opieki klinicznej, a po drugie przez niezależny zespół czterech patologów, którzy nie mieli wiedzy na temat innych klinicznych lub laboratoryjnych danych kobiet. Diagnozy zostały przypisane zgodnie z układem śródnabłonkowej neoplazji szyjki macicy Bethesda.24
Wykrywanie DNA HPV
Próbki narządów płciowych przygotowano do PCR zgodnie ze standardowymi metodami. DNA amplifikowano za pomocą swoistych dla typu HPV starterów opartych na genach HPV-16 L1, E6 i E7. Produkty PCR zidentyfikowano przez hybrydyzację z użyciem oligonukleotydów specyficznych dla typu HPV i genu. Dodatni wynik został zdefiniowany jako każdy sygnał, który przekroczył poziom tła związany z próbką ludzkiego DNA z ujemną pod względem HPV. W każdym oznaczeniu uwzględniono odpowiednie kontrole ujemne i pozytywne. Każda próbka, która uzyskała wynik dodatni przynajmniej dla dwóch genów, została uznana za pozytywną. Dowolna próbka, która uzyskała wynik dodatni tylko dla jednego genu, została uznana za pozytywną, jeśli podczas ponownego badania była pozytywna dla dwóch lub trzech genów lub tego samego pojedynczego genu. W badaniach walidacyjnych wykazano, że prawdopodobieństwo tego testu wynosi ponad 95% przy wykrywaniu co najmniej 13 kopii na próbkę. Kliniczna walidacja testu wykazała, że 95-procentowy górny poziom ufności dla fałszywej negatywności i fałszywej dodatni wynosił odpowiednio 0,7% i 0,8%.
Test serologiczny HPV-16
Konkurencyjny test radioimmunologiczny opracowany przez Merck Research Laboratories został wykorzystany do ilościowego oznaczenia przeciwciał HPV-16 w surowicy.25 Wyniki odczytano z krzywej standardowej, skorygowano o rozcieńczenie i podano w arbitralnych jednostkach (milli-Merck Units lub mMU na mililitr). Ustalony odcięcie 5,9 mMU na mililitr (otrzymane przez wielokrotne testowanie panelu próbek dodatnich i ujemnych względem krzywej standardowej) zastosowano do określenia statusu serologicznego HPV-16 u kobiet. W momencie włączenia do badania oceniano także surowicę wszystkich kobiet za pomocą testu immunoenzymatycznego HPV-16.
Podstawowa definicja przypadku
Hipoteza pierwotnej skuteczności stwierdziła, że w porównaniu ze szczepionką placebo szczepionka przeciw wirusowi podobnemu do wirusa LV wirusa HPV-16 zmniejsza częstość występowania przetrwałego zakażenia HPV-16
[hasła pokrewne: sól himalajska do kąpieli, zeaksantyna występowanie, psycholog warszawa ursynów ]
[hasła pokrewne: poradnia gastrologiczna dla dzieci, choroba huntingtona objawy, sól himalajska do kąpieli ]